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    乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基原理及實驗現(xiàn)象

    更新時間:2024-06-20   點(diǎn)擊次數(shù):713次

    一、用途:

      用于乳酸菌的分離培養(yǎng)。


    二、實驗原理:

      胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、維生素、生長因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氫二鉀為緩沖劑;枸櫞酸三銨、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵、吐溫-80和乙酸鈉為培養(yǎng)各種乳酸菌提供生長因子,吐溫80為乳酸桿菌提供所需的代謝脂肪酸;檸檬酸銨和乙酸鈉能夠抑制一些雜菌的生長,包括鏈球菌、霉菌和除乳酸桿菌外的大多數(shù)口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑制了其它細(xì)菌的生長,有利于乳酸桿菌的分離;加入碳酸鈣是由于乳酸菌在培養(yǎng)基中產(chǎn)酸可以形成溶鈣環(huán),便于區(qū)分;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。


    三、培養(yǎng)基配方(g/L):

    酵母浸粉

    2.0

    胰酪蛋白胨

    10.0

    磷酸二氫鉀

    2.0

    牛肉浸粉

    10.0

    硫酸鎂

    0.2

    葡萄糖

    20.0

    乙酸鈉

    5.0

    枸櫞酸三銨

    2.0

    硫酸錳

    0.05

    碳酸鈣

    5.0

    吐溫80

    1.0

    瓊脂

    25.0

    pH 6.0-6.5  25℃

    此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成分以獲得最佳的結(jié)果

    四、試驗方法:

      1、稱取本品82.25g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶,每瓶 200ml,115℃高壓滅菌 15-20min,冷至 50℃左右時,傾入無菌平皿,備用。

      2、制備質(zhì)控菌液。

      3、用1μL接種環(huán)取非目標(biāo)菌質(zhì)控菌液1環(huán),將接種環(huán)接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表面劃三區(qū),同時接種兩個平板。

      4、36±1°C下培養(yǎng)24-48小時,記錄實驗結(jié)果。


    五、結(jié)果觀察與解釋:

      接種以下質(zhì)控菌株,在36±1℃下培養(yǎng)24-48小時:

    質(zhì)控菌株

    菌株編號

    接種量(CFU)

    方法

    質(zhì)控評定標(biāo)準(zhǔn)

    其他特征

    嗜酸乳桿菌

    CICC6005

    /

    定性

    +++

    白色突起菌落,有溶鈣環(huán)

    植物乳桿菌

    ATCC8014

    /

    定性

    +++

    白色突起菌落,有溶鈣環(huán)


    圖1 植物乳桿菌微生物質(zhì)控結(jié)果


    六、注意事項:

      本培養(yǎng)基僅為細(xì)菌鑒定的一部分,需做其他補(bǔ)充試驗。



    注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。


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